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企業(yè)新聞

膠體金免疫層析產(chǎn)品開(kāi)發(fā)經(jīng)驗分享

一、PH在膠體金技術(shù)中是非常重要的,不同抗體的標記的PH主要是根據最后的實(shí)驗結果(陽(yáng)性程度,敏感度等)來(lái)確定的,每種產(chǎn)品的PH都要摸索,沒(méi)有固定的 
1、合適的PH決定標記蛋白與裸金的結合效率,以及結合的穩定性
2、適當的PH對于標記后的膠體金的液態(tài)保存的穩定性有影響
3、適當的PH對于產(chǎn)品的假陽(yáng)性以及假陰性有一定的控制
4、適當的PH可以調整T線(xiàn)的顯色強度

二、最適蛋白標記量:直接把不同的標記量的金做成半成品,看標記濃度低到啥程度對結果沒(méi)影響,在那個(gè)基礎上再適當提高點(diǎn)濃度就成了。

三、表面活性劑有破膜的作用,紅細胞膜破了,血紅蛋白出來(lái)了,背景自然也就高了,當然并不是所有的表面活性劑都有破膜的作用或者破膜作用并不嚴重。用全血過(guò)濾膜只能過(guò)濾紅細胞,但是表面活性劑選擇不對,背景還是不會(huì )有太大的改善。如果是用快速診斷方法檢測,建議使用新鮮的血液,超過(guò)一周的最好就處理掉把,血液長(cháng)時(shí)間放置會(huì )自發(fā)性的溶血,保存在2-8度,低溫凍存更會(huì )加速溶血。全血檢測需加入全血分離膜,分離血漿和血細胞(主要是紅細胞),全血分離膜是否要處理看具體的要求,以及使用的種類(lèi)。表面活性劑的種類(lèi)及濃度如果控制不好會(huì )加速紅細胞的破裂,

四、T線(xiàn)邊緣深中間淺的原因:樣品墊或者樣品稀釋液的配方:注重PH,離子強度,表面活性劑三方面。酸堿度一般可以選擇7.5-9之間
離子強度可以在20-150mM之間
表面活性劑,多嘗試下不同的濃度和種類(lèi),一般常用的是Tween,TritonX-100,濃度在0.1-1%左右

五、釋放慢可能有幾個(gè)原因:
1.金標墊本身的材質(zhì)決定。但是這個(gè)可能性比較小
2.如果你是浸泡法處理,處理液中蛋白或者大分子材料,以及糖的濃度都會(huì )影響金的釋放, 
3.如果你是噴金,金標墊如需預處理,預處理液液有可能影響,原因同上
4.最后一個(gè)估計是最不愿遇到的,處理液的配方?jīng)]有選擇好,噴金或者浸泡后,部分膠體金變性聚集,無(wú)法層析

閱讀:  2016-12-15 09:47:56  

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